羊布鲁菌OMP31蛋白基因表达及抗原性分析
目的 构建布鲁菌OMP31蛋白原核表达载体,获得OMP31蛋白.方法 PCR扩增OMP31基因,连接入pET-30a(+)表达载体中,构建pET-30a(+)/OMP31质粒,双酶切鉴定、测序正确后,转化人大肠埃希氏菌BL21(DE3)中,以不同浓度的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,并通过二十烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析；蛋白质免疫印迹(western blot)初步分析其免疫原性.结果 成功构建pET-30a(+)/OMP31表达载体,并表达出OMP31蛋白,分子量约为31 kDa,主要以包涵体形式存在；通过复性获得＞95％的高纯度可溶性蛋白；以布鲁菌虎红平板阳性血清检测,显示复性后蛋白具有良好的免疫反应性.结论 成功表达出带组氨酸(HIS)标签的OMP31融合蛋白,且具有较好的蛋白抗原性.
布鲁菌、OMP31、表达载体构建、蛋白表达、抗原性
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R378.5(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
国家973计划项目2010CB530204;国家自然科学基金31100657;广东省大学生创新实验项目1212110032
2013-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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