副溶血弧菌不耐热溶血毒素的表达与纯化

摘要：

目的表达和纯化融合表达的副溶血弧菌不耐热溶血毒素.方法将表达载体pET32a+-tlh转化大肠杆菌BL21(λDE3),诱导表达副溶血弧菌不耐热溶血毒素,表达产物用聚丙稀酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定,8 mmol/L的尿素溶解包涵体,用6×his组氨酸蛋白质镍亲和层析树脂亲和层析纯化目的蛋白.结果诱导表达的目的蛋白以包涵体形式存在,其含量约占菌体总蛋白的10%,纯化获得了高纯度的融合表达的副溶血弧菌不耐热溶血毒素.结论转化有重组质粒pET32a+-tlh的BL21(λDE3)可稳定高效地表达目的蛋白,采用低浓度的咪唑、β-巯基乙醇和Tritonx-100等方法减少杂蛋白污染,亲和层析纯化目的蛋白,可获得高纯度的目的蛋白.

关键词：副溶血弧菌、不耐热溶血毒素、包涵体、纯化蛋白

所属期刊栏目：20

分类号：R378.3(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：军队指令性项目01L050

在线出版日期：2004-03-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共2页

页码：27-28