抗丁丙诺啡单克隆抗体的制备

摘要：

目的 建立抗丁丙诺啡单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备高特异性的丁丙诺啡单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定.方法 在丁丙诺啡的分子上连接活性羧基基团,通过缩合反应将丁丙诺啡半抗原连接于血蓝蛋白(KLH)和小牛血}苛白蛋白(BSA),形成完全抗原.以完全抗原免疫Balh/c小鼠,通过细胞融合,筛选等杂交瘤技术,建立稳定的分泌抗丁丙诺啡单克隆抗体的杂交瘤细胞株.通过腹腔注射杂交瘤细胞,诱导小鼠产生含有单抗的腹水.用辛酸·硫酸铵加亲和层析法纯化抗丁丙诺啡单克隆抗体.采用酶联免疫反应和胶体金膜层析实验测定丁丙诺啡单抗的特异性以及免疫反应动力学参数.结果 共获得3株分泌抗丁丙诺啡单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为7E6,6G4和3C2.7E6,6G4抗体灵敏度为10.0ng/ml,3C2抗体灵敏度为20.0ng/ml.7E6,6G4和3C2抗体的亲和常数分别为3.6×10-9mol/L,4.3×10-3mol/L和6.3×10-9mol/L.特异性测试结果表明7E6和6G4抗体与40种药物、毒品无任何交叉反应,而3C2抗体与吗啡有交叉反应.结论 杂交瘤细胞株7E6和6G4产生的抗丁丙诺啡单克隆抗体具有很高的特异性和灵敏度.

关键词：法医物证学、丁丙诺啡、杂交瘤、单克隆抗体、免疫学

所属期刊栏目：23

分类号：R97;R96

资助基金："十一五"国家科技支撑计划项目基金2006038022001

在线出版日期：2009-01-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：366-369