卵巢癌相关基因HFA在杆状病毒表达系统的表达与鉴定

摘要：

目的:使卵巢癌相关基因HFA在杆状病毒表达系统中获得表达.方法:将卵巢癌相关基因HE4克隆到pMagic-his-HE4中,通过转化E.coli DH10B筛选克隆,阳性克隆通过接合转移的方式与杆状病毒框架质粒体外重组,构建Bac-phes-HE4杆状病毒表达载体,后者经Lipofectamine 2000介导转染Sf 9细胞,获取重组病毒,扩增病毒并感染Sf 9细胞进行表达,SDS-PAGE、Westernblot分析鉴定表达蛋白.结果:经HE4抗体、6×His单抗鉴定,成功通过杆状病毒表达系统获得重组卵巢癌相关基因HE4.结论:卵巢癌相关基因HFA通过接合转移的方法在杆状病毒表达系统中成功表达.

关键词：克隆细胞、Sf9细胞、杆状病毒科、HE4基因、病毒、基因表达

所属期刊栏目：25

分类号：R737.31(肿瘤学)

资助基金：广东省卫生厅医学科研基金A2006375

在线出版日期：2010-04-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：240-242