树突细胞miR-17调节初始CD4+T淋巴细胞分化Treg/Th17失衡机制的研究

摘要：

目的:探讨微小RNA-17(miR-17)调节肺结核患者外周血树突细胞(dendritic cells,DC)对初始CD4+T淋巴细胞分化为调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)及辅助性T细胞17(T help cell 17,Th17)的作用及分子机制.方法:采集2022年2月1日至4月30日在浙江大学医学院附属杭州市胸科医院收治的肺结核患者20例(肺结核组)和同期的门诊健康体检者20名(健康对照组)的外周血,采用qPCR检测两组DC中miR-17表达水平.将肺结核组患者的成熟DC与健康对照组的初始CD4+T淋巴细胞共同培养后分别加入miR阴性对照物(miR阴性对照组)、miR-17模拟物(miR-17模拟物组)和miR-17抑制剂(miR-17抑制剂组).采用流式细胞仪检测上述3组共同培养细胞中Treg细胞和Th17细胞的分化比例,采用qPCR检测初始CD4+T淋巴细胞中的Eos mRNA转录水平,并利用蛋白免疫印迹法检测Eos mRNA表达.结果:肺结核组DC的miR-17基因表达水平(12.546±1.572)明显高于健康对照组DC的表达水平(2.409±1.097),差异有统计学意义(t=28.356,P＜0.05)o miR-17模拟物组的Treg细胞比例(4.740％±0.901％)明显低于miR阴性对照组(59.235％±4.652％),差异有统计学意义(t=50.755,P＜0.01);miR-17模拟物组的Th17细胞比例(67.610％±3.495％)明显高于miR阴性对照组(27.645％±2.075％),差异有统计学意义(t=38.521,P＜0.01).miR-17抑制剂组的Treg细胞比例(83.080％±5.770％)明显高于miR阴性对照组(59.235％±4.652％),差异有统计学意义(t=14.988,P＜0.01);miR-17抑制剂组的Th17细胞比例(11.405％±1.777％)明显低于miR阴性对照组(27.645％±2.075％),差异具有统计学意义(t=27.044,P＜0.01).miR-17模拟物组的初始CD4+T淋巴细胞内Eos mRNA基因转录水平(0.181±0.123)下调至38.4％,明显低于miR阴性对照组(0.471±0.217),差异有统计学意义(t=10.449,P＜0.05);miR-17抑制剂组的初始CD4+T淋巴细胞内Eos mRNA基因转录水平(0.889±0.295)上调至1.887倍,明显高于miR阴性对照组(0.471±0.217),差异有统计学意义(t=16.635,P＜0.05).miR-17模拟物组的初始CD4+T淋巴细胞内Eos相对表达量(3.626±1.319)减少至77.7％,明显低于miR阴性对照组(4.664±1.456),差异有统计学意义(t=8.528,P＜0.05);miR-17抑制剂组的初始CD4+T淋巴细胞内Eos相对表达量(6.148±1.701)增加至1.318倍,明显高于miR阴性对照组(4.664±1.456),差异有统计学意义(t=8.035,P＜0.05).结论:DC miR-17调节初始CD4+T淋巴细胞分化Treg/Th17失衡从而参与结核分枝杆菌感染的过程.

关键词：分枝杆菌、结核、树突细胞、T淋巴细胞、微小RNA

所属期刊栏目：45

分类号：R392.11;R521

资助基金：杭州市科技发展计划20180533B72

在线出版日期：2023-01-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：67-72