耐多药肺结核患者外周血中性粒细胞抗结核活性的初步研究

摘要：

目的 探讨耐多药结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)的耐药特性是否与其减弱人外周血多形核白细胞(polymorphonuclear leukocyte,PMN)的凋亡能力,从而逃避机体免疫杀伤有关.方法 搜集2017年5月至2018年9月就诊于深圳市宝安区慢性病防治院并确诊的10例耐多药肺结核患者(耐多药组)和10例药物敏感肺结核患者(非耐药组),分别获取其MTB临床分离株并冻存,菌株均经比例法药物敏感性试验确证.分别抽取患者外周血6 ml,分离PMN(两组分别为RPMN和SPMN),同时制备MTB抗原(两组分别为RMTB和SMTB).将分离出的 PMN 与 MTB 体外共培养后,获得 RPMN、RPMN+RMTB、RPMN+SMTB、SPMN、SPMN+RMTB、SPMN+SMTB共6组检测标本.应用荧光倒置显微镜、酶联免疫吸附试验、分光光度法观察PMN的凋亡率,以及检测PMN中Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)水平和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活化程度.结果 未经MTB抗原刺激的RPMN组的凋亡率[(30.67±3.03)％]明显低于SPMN组[(36.54±2.49)％],但高于 RPMN+RMTB组[(21.74±3.35)％],差异均有统计学意义(t值分别为4.728和6.254,P值均为0.000);而RPMN+RMTB组明显低于SPMN+SMTB组[(50.84±3.38)％],也明显低于RPMN+SMTB组[(34.66±3.05)％],差异均有统计学意义(t值分别为16.699和9.018,P值均为0.000);SPMN+SMTB组明显高于SPMN+RMTB组[(33.56±2.94)％],也明显高于SPMN组,差异均有统计学意义(t值分别为12.200和8.974,P值均为0.000).未经MTB抗原刺激的SPMN组PMN的TLR2[(24.94±1.77)ng/ml]及 Caspase-3(6.77±0.73)水平均明显高于 RPMN组[分别为(13.46±1.67)ng/ml 和4.85±0.91],差异均有统计学意义(t值分别为14.931和5.224,P值均= 0.000);而SPMN+SMTB组PMN的TLR2[(28.32±3.00)ng/ml]及 Caspase-3(6.33±0.93)水平均明显高于 RPMN+RMTB组[分别为(15.25±2.10)ng/ml 和4.95±1.07)],差异均有统计学意义(t值分别为11.297和3.063,P值分别为0.000和0.007);SPMN组的TLR2水平明显高于SPMN+RMTB组[(22.23±1.90)ng/ml],但明显低于SPMN+SMTB组,差异均有统计学意义(LSD-t检验,P值均＜0.05).结论 耐多药MTB抗原刺激的PMN的凋亡率、Caspase-3活化程度和TLR2水平均低于未经MTB抗原刺激的PMN,提示耐多药肺结核患者的PMN可能存在与TLR2水平下调和Caspase-3活化程度降低相关的凋亡抑制.

关键词：分枝杆菌、结核、结核、抗多种药物性、人中性粒细胞、抗结核作用、细胞凋亡

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资助基金：深圳市科技计划基础研究项目; 深圳市宝安区科技计划基础研究项目

在线出版日期：2021-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：352-356