DNA实时荧光恒温扩增法在结核病临床检测中的应用价值

摘要：

目的 分析DNA实时荧光恒温扩增法(简称“恒温扩增法”)在结核病临床检测中的应用价值.方法 收集2019年1-6月西安市胸科医院收治的疑似肺结核患者2421例,其中共有356例患者留取的痰液标本同时进行了BACTEC MGIT 960液体培养、利福平耐药实时荧光定量核酸检测(GeneXpert MTB/RIF法)、传统DNA实时荧光定量核酸检测(FQ-PCR法)、结核分枝杆菌RNA实时荧光恒温扩增(SAT-RNA法)、恒温扩增法检测.以MGIT 960技术检测结果为金标准,计算其他4种检测技术的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率、Kappa值.对恒温扩增法阳性的121份核酸样本使用熔解曲线法检测利福平ropB基因,研究恒温扩增法提取核酸应用于耐药基因检测的价值.结果 以MGIT 960技术检测结果为金标准,恒温扩增法的敏感度(78.83％,108/137)低于GeneXpert MTB/RIF法(95.62％,131/137),高于FQ-PCR法(74.45％,102/137)和SAT-RNA法(59.12％,81/137),差异均有统计学意义(x2值分别为47.437、43.654、29.467,P值均＜0.001).GeneXpert MTB/RIF法的ROC曲线下面积最大(0.910),随后依次为恒温扩增法(0.860)、FQ-PCR法(0.854)、SAT RNA法(0.789).恒温扩增法阳性的核酸标本用熔解曲线法检测利福平ropB耐药基因,原核酸和稀释5倍后核酸荧光检测的dt值(探测时间,detection time,1dt=1 min)在26～30时,ropB基因的检出率分别为93.55％(29/31)和90.32％(28/31);dt值在15～25时,ropB基因的检出率分别为94.44％(34/36)和100.00％(36/36).结论 通过与各种检测技术比较,恒温扩增法具有临床应用价值,并适用于基层医院的结核病诊断.

关键词：分枝杆菌、结核、核酸扩增技术、实验室技术和方法、对比研究、数据说明、统计

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资助基金：陕西省重点研发计划2018SF-254

在线出版日期：2020-12-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1294-1298