结核病诊断性血清学特异抗原的筛选和鉴定

摘要：

目的 筛选和鉴定结核病患者血清抗体特异性识别的结核分枝杆菌抗原.方法 于改良罗氏培养基中培养结核分枝杆菌标准株H37Rv 4周,收集菌体,通过冰浴超声法提取结核分枝杆菌菌体抗原.收集2013年2 7月湖南省结核病防治所首次入院的30例初治结核病患者的血清,以及收集2013年7月湖南省人民医院检验科接收的20名健康体检者的血清.通过饱和硫酸铵沉淀法提取纳入的20例结核病患者的血清IgG,从结核分枝杆菌菌体抗原中免疫共沉淀血清学抗原,以纳入的其余10例结核病患者血清免疫印迹(Western blot,WB)验证其免疫反应性;从十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)胶上切割阳性反应的蛋白质条带,通过串联质谱技术进行鉴定.结果 免疫共沉淀获得1条相对分子质量为16 000(16 kDa)、能被结核病患者血清抗体特异性识别的蛋白质条带;经串联质谱鉴定,获得结核分枝杆菌热休克蛋白(heat shock protein,Hsp) 16.3、糖基转移酶蛋白、铁调控Lsr2蛋白前体等3种蛋白抗原.结论 采用免疫共沉淀偶联质谱技术获得3种结核分枝杆菌血清学抗原,可为结核病血清学诊断性抗原的选择进一步提供依据.

关键词：分枝杆菌、结核、血清学、抗原、免疫沉淀法、串联质谱法

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资助基金：湖南省人民医院仁术科研发展基金20121221

在线出版日期：2019-12-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1217-1222