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结核病新疫苗的免疫毒理学评价方法研究

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目的 建立疫苗评价用豚鼠免疫毒理学评价方法,并应用建立的评价指标对结核病新疫苗(耻垢疫苗)的免疫毒性进行初步评价.方法 制备豚鼠过敏模型30只,阴性对照15只.建立豚鼠血清总IgG1抗体检测和外周血嗜碱粒细胞体外刺激培养上清、支气管肺泡灌洗液上清,以及腹腔灌洗液中肥大细胞体外刺激培养上清中的过敏性介质(组胺和白三烯)含量的检测方法.将豚鼠分成3组,分别为过敏模型组、耻垢疫苗组和阴性对照组,每组6只,应用已建立的以上几种评价指标初步进行了结核病新疫苗(耻垢疫苗)的免疫毒性评价.结果 以6 μg/ml羊抗豚鼠IgG1抗体包被,待测血清稀释1∶105,以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗豚鼠IgG1抗体稀释1 ∶ 20 000的实验条件为豚鼠血清总IgG1抗体的最佳检测方法.外周血嗜碱粒细胞体外刺激培养上清中,豚鼠过敏模型组和对照组中组胺含量分别为(99.37±15.34) nmol/L和(29.94±5.86) nmol/L;白三烯含量分别为(13.09±3.87) pg/ml和(2.22±0.53)pg/ml.支气管肺泡灌洗液上清组胺含量分别为(73.42±18.60) nmol/L和(31.00±12.09)nmol/L,白三烯含量分别为(123.20±16.57) pg/ml和(39.05±16.94) pg/ml.腹腔灌洗液中肥大细胞体外刺激培养上清中组胺含量分别为(39.59±12.94) nmol/L和(14.35±5.85) nmol/L,白三烯含量分别为(6.79±2.58)pg/ml和(3.09±1.18) pg/ml.以上3种不同组织来源的样本中,过敏模型组的组胺和白三烯含量与对照组相比差异均有统计学意义(组胺:t=12.60,t=5.41,t=5.20,P<0.05;白三烯:t=8.46,t=9.15,t=3.85,P<0.05).应用以上方法评价结核病新疫苗未见免疫学毒理学异常反应.结论 实验初步建立了免疫毒理学评价方法,以该方法评价耻垢疫苗未见免疫毒理学异常反应.

结核菌苗、毒理学、超敏反应、速发型、分枝杆菌、耻垢、评价研究

34

R18;TS2

"十一五"国家科技重大专项2009ZX1004-803

2014-01-03(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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1000-6621

11-2761/R

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2012,34(3)

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