下调HOTAIR通过提高PTEN表达逆转HCC827细胞吉非替尼耐药

摘要：

背景与目的 肺癌是发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,其中80％以上为非小细胞肺癌.HOX转录反义RNA(HOX transcript antisense RNA,HOTAIR)异常表达于多种肿瘤组织,并参与调控肺癌的发生与发展,本研究旨在探讨下调HOTAIR对肺腺癌HCC827细胞对吉非替尼药物耐药的影响及其机制.方法 应用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)法检测HCC827细胞及HCC827吉非替尼耐药细胞(HCC827GR)中HOTAIR的表达情况,利用生物信息学分析预测HOTAIR靶基因,应用脂质体转染法将体外合成的针对HOTAIR的siRNA转染入HCC827GR细胞中,采用RT-qPCR及Western blot方法检测其HOTAIR及PTEN、PI3K、AKT的表达水平,同时采用MTT法检测各组细胞的吉非替尼半数抑制浓度(50％inhibitory concentration,IC50),运用流式细胞术分析各组细胞凋亡率的变化.结果 RT-qPCR结果显示HOTAIR在HCC827GR耐药细胞及吉非替尼耐药患者血清中表达增高,利用生物信息学分析预测到PTEN的为HOTAIR潜在靶基因.RT-qPCR及Western blot结果显示HCC827GR细胞经转染HO-TAIR siRNA后,HOTAIR表达降低(P<0.05),而PTEN表达升高,PI3K及AKT表达下降(P<0.05);与对照组比较,下调HOTAIR的HCC827GR细胞对吉非替尼的IC50值下降(P<0.05),细胞增殖能力下降、凋亡率升高(P<0.05).结论 下调HOTAIR表达可抑制HCC827GR细胞增殖,促进其凋亡,并可降低HCC827GR细胞的吉非替尼IC50,下调HOTAIR后PTEN表达升高,而PI3K及AKT表达下降提示下调HOTAIR可通过靶向调控PTEN/PI3K/AKT通路逆转HCC827GR细胞对吉非替尼的耐药.

关键词：HOTAIR、PTEN、HCC827细胞、吉非替尼、耐药性

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资助基金：本研究受陕西省自然科学基础研究计划一般项目No.2019JQ-566

在线出版日期：2020-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：762-771