MiR-503逆转肺癌耐药细胞株A549/DDP的耐药性及其机制研究

摘要：

背景与目的临床上肺癌细胞往往出现对顺铂的耐药性，因此探讨肿瘤细胞的耐药机制，开发新的逆转耐药性的方法，对提高临床患者的受益有十分重要的意义。miRNA可通过其调控的目标基因，对多种与肿瘤细胞失控生长、抗凋亡、迁移和侵袭，甚至是肿瘤细胞对药物治疗的应答产生调控作用。本实验旨在探讨miR-503对肺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP的耐药性逆转及其相关作用机制。方法应用MTS法检测miR-503对A549/DDP细胞顺铂耐受性的影响，流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡率以及胞内罗丹明-123（Rhodamine-123, Rh-123）含量的变化， Western blot法和Real time PCR检测肿瘤细胞多药耐药蛋白MDR1、MRP1、Survivin和Bcl-2蛋白表达，以及Akt磷酸化的变化，应用双萤光报告基因技术检测细胞NF-κB和AP-1转录活性。结果与对照细胞组相比较，miR-503转染A549/DDP细胞株后，可明显增加细胞对顺铂的敏感性，使耐药逆转倍数增加为2.48倍，Rh-123含量升高2.49倍，细胞凋亡率提高10.3倍；在转录水平检测发现，与对照组相比较，miR-503转染的细胞中MDR1、MRP1、ERCC1、Survivin及Bcl-2等与肿瘤耐药相关基因的mRNA表达水平明显下调，而RhoE mRNA表达水平则明显升高（P<0.05）；进一步在蛋白水平亦证实MDR1、MRP1、ERCC1、Survivin、Bcl-2以及p-Akt的表达明显下降，RhoE的表达明显上升。结论miR-503可逆转A549/DDP对顺铂的耐药性，这一作用可能与抑制药物外排，负调控肿瘤耐药相关蛋白的表达，促进细胞凋亡有关。

关键词：微小RNA、肺肿瘤、耐药

分类号：R73;R96

资助基金：天津市科技支撑计划重点项目12ZCDZSY16100;教育部新世纪优秀人才计划NCET-10-0956

在线出版日期：2014-03-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1-7