FasL基因siRNA表达载体的构建及其在肺癌A549细胞中的表达

摘要：

背景与目的 Fas/FasL是肿瘤坏死因子超家族成员,与肿瘤细胞的凋亡有关.激活的淋巴细胞由于FasL表达上调对于Fas/FasL凋亡途径非常敏感,从而可能被肿瘤细胞反杀伤攻击,使激活的淋巴细胞被清除掉.为研究FasL基因的功能及肺癌的基因治疗,构建了针对FasL基因的siRNA的表达载体,观察转染细胞A549后其对激活的T淋巴细胞的反杀伤作用.方法 利用网站选择适当位点设计并合成针对FasL基因mRNA的寡核苷酸序列,插入质粒pGCsi-U6中形成重组载体pSi-FasL.重组载体经测序鉴定后转染肺癌细胞A549,Western blot检测转染前后FasL蛋白的表达情况.结果 测序结果与所合成的寡核苷酸完全一致,证实成功构建了针对FasL基因的siRNA表达载体.Western blot检测显示转染肺癌细胞A549后有效抑制了FasL基因的表达.结论 针对FasL基因的siRNA表达载体成功构建,并能有效的抑制肺癌细胞A549中FasL基因的表达.

关键词：载体构建、肺肿瘤、siRNA、RNA干扰、FasL

所属期刊栏目：11

分类号：R734.2;Q786(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30772145;30400440;重庆市自然科学基金CSTC,2006BB5081

在线出版日期：2008-05-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：46-50