10.11798/j.issn.1007-1520.202322099
下调内质网相关降解蛋白-1对鼻咽癌CNE-2Z细胞化疗敏感性的作用及机制
目的 探讨下调内质网相关降解蛋白(Derlin-1)对鼻咽癌CNE-2Z细胞株化疗敏感性的作用及机制.方法 收集10例鼻咽癌患者鼻咽癌组织及癌旁正常组织并通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测组织中Derlin-1 mRNA含量;本实验分组:空白对照组(control组)、阴性对照组(NC组)、敲低组(si-Derlin-1组).RT-qPCR法检测鼻咽癌Derlin-1 mRNA的表达;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同顺铂浓度时3组细胞的增殖;Annex-in V-FITC/PI双染法检测顺铂浓度为5 μmol/L时3组细胞的凋亡率;Transwell检测顺铂浓度为5 μmol/L时3组细胞的侵袭迁移能力;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法、Western blot法检测Bcl-2、Bax、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9 mRNA及蛋白相对表达量.结果 RT-qPCR结果显示,鼻咽癌癌组织中Derlin-1 mRNA相对表达量较癌旁正常组织显著减少,差异具有统计学意义(P＜0.05);si-Derlin-1组Derlin-1 mRNA较control组、NC组明显下降,差异具有统计学意义(P＜0.05)MTT法结果显示,与control组、NC组相比,si-Derlin-1组细胞增殖率明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.05);Annexin V-FITC(绿色荧光)/PI(红色荧光)双染法结果可见,当DDP浓度为5 μmol/L时,si-Derlin-1 组细胞凋亡率为(29.65±2.35)％,较 control 组(13.24±1.43)％、NC 组(15.09±1.32)％明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.05);Transwell实验结果显示,当DDP浓度为5 μmol/L时,si-Derlin-1组细胞迁移率、侵袭率分别为(20.15±2.20)％、(22.33±3.5)％,较对照组(100±1.3)％、(99±2.43)％以及 NC 组(96.72±3.22)％、(94.44±1.21)％明显降低,差异具有统计学意义(F迁移率=1080.610,P=0.000)、(F侵袭率=848.590,P=0.000);RT-qPCR结果显示,相比control 组、NC组,si-Derlin-1组凋亡抑制因子Bcl-2 mRNA的表达量下降,凋亡诱导因子Bax mRNA表达量上调;si-Derlin-1组迁移相关因子MMP2与MMP9 mRNA相对表达量明显下降,差异均具有统计学意义(P均＜0.05);Western blot结果显示,相比control组、NC组,si-Derlin-1组凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达量下降,凋亡诱导蛋白Bax表达量上调;si-Derlin-1组迁移相关蛋白MMP2与MMP9蛋白相对表达量明显下降,差异均具有统计学意义(P均＜0.05).结论 Derlin-1在鼻咽癌中表达上调,下调Derlin-1可提高鼻咽癌CNE-2Z细胞化疗敏感性,机制可能与促进细胞凋亡、抑制迁移有关.
鼻咽癌、内质网相关降解蛋白、化疗敏感性、凋亡、侵袭迁移
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R739.63(肿瘤学)
湖南省卫生健康委科研计划项目202107010022
2023-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
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