shRNA-hIAP2增强CNE-1鼻咽癌细胞对放射敏感性的实验研究

摘要：

目的 构建人凋亡抑制蛋白(human inhibitor of apoptosis protein2,hIAP-2)的shRNA,靶向抑制hIAP-2基因联合放疗,探讨其对CNE1鼻咽癌细胞株放射敏感性的影响.方法 首先采用MTT法确定最佳放射剂量;再构建4条hIAP-2-shRNA沉默片段并用脂质体法转染CNE1细胞,最后采用实时荧光定量PCR(Q-PCR)和免疫印迹法(Western blot,WB)筛选出最佳沉默shRNA序列;用最佳沉默shRNA序列转染CNE1细胞,分别设置转染放射线照射组与未转染放射线照射组,采用实时定量PCR和WB检测hIAP-2的基因及其蛋白表达;流式细胞术测细胞凋亡,transwell测细胞侵袭能力.结果 MTT法明确4Gy为最佳放射剂量;Q-PCR和WB检测结果显示4条hIAP-2-shRNA均能有效抑制hIAP-2 mRNA及蛋白表达(P＜0.05),以hIAP-2-shRNA2沉默效果最显著(P ＜0.05);Q-PCR和WB检测结果显示转染hIAP-2-shRNA2后照射组与未转染hIAP-2-shRNA2照射组的CNE1细胞中hIAP-2基因与蛋白表达比较,差异具有统计学意义(P＜0.05);流式细胞术检测结果显示转染hIAP-2-shRNA2后照射组比未转染hIAP-2-shRNA2照射组凋亡率差异具有统计学意义(P＜0.05);transwell检测结果显示转染hIAP-2-shRNA2后照射组与未转染hIAP-2-shRNA2照射组侵袭能力差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 转染hIAP-2基因沉默后放射可增加鼻咽癌细胞凋亡率,降低其侵袭能力,能够起到放疗增敏作用.

关键词：人凋亡抑制蛋白、鼻咽癌细胞、RNA沉默、放射敏感性

所属期刊栏目：19

分类号：R730.5;R739.91(肿瘤学)

在线出版日期：2016-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：393-398