弯曲杆菌16S rRNA基因质粒DNA标准物质的研制

摘要：

弯曲杆菌引起的食源性胃肠道疾病是 21 世纪人类面临的一项严重经济和公共卫生负担.当前国内外进行的弯曲杆菌属分子生物学检测方法研究的靶基因均为 16S rRNA基因.为满足检测试剂标准化需求,制备了候选弯曲杆菌 16S rRNA基因质粒DNA标准物质,经均匀性和稳定性检验,证实其于-20℃保存 12 个月,4℃短期保存 8 d,反复冻融 30 次后依然稳定.对候选标准物质采用微滴式数字PCR(ddPCR)方法,联合 8 家实验室进行联合定值,对不确定度进行量化、合成,确定了标准物质的扩展不确定度.最终确定弯曲杆菌16S rRNA质粒DNA标准物质标准值为 4.95×103 copies/μL,扩展不确定度(k = 2)为0.47×103 copies/μL.临床试用结果表明,该产品具有良好的均匀性和稳定性.该标准物质的研制,为我国弯曲杆菌分子生物学检测试剂的标准化奠定了基础.

关键词：弯曲杆菌、16S rRNA基因、标准物质、均匀性、稳定性、可重复性

所属期刊栏目：40

分类号：Q93-331(微生物学)

资助基金：国家重点研发计划;国家重点研发计划;山东省重点研发计划项目;中国动物卫生与流行病学中心创新基金项目

在线出版日期：2023-07-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：103-109