基因Ⅶ.2亚型新城疫病毒反转录数字PCR检测方法的建立与应用

摘要：

基因Ⅶ型新城疫病毒(NDV)是严重危害我国家禽养殖业健康发展的主要病原之一.国家新城疫参考实验室监测表明,目前国内NDV流行毒株已由基因Ⅶ.1.1 亚型转变为Ⅶ.2 亚型.为实现基因Ⅶ.2 亚型NDV的快速检测和精准定量,针对其国内流行毒株F基因保守区域设计了特异性引物和探针,建立了一种可快速检测基因Ⅶ.2 亚型NDV的反转录数字PCR(RT-dPCR)方法,并评估了该方法的敏感性、特异性和重复性.结果显示:建立的RT-dPCR方法检测下限为 1.30 copies/μL,敏感性较高;特异性强,与基因Ⅵ型、Ⅻ型NDV以及其他常见禽病病毒(禽流感病毒、鸡传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒和禽腺病毒)无交叉反应;重复性试验变异系数为2.6％,小于3％,重复性好.利用本方法对从活禽市场采集的200份鸡口咽/泄殖腔拭子样品进行检测,发现检测结果与病毒分离鉴定结果一致.结果表明,本研究建立的RT-dPCR方法具有良好的敏感性、特异性、重复性和准确性,可用于基因Ⅶ.2 亚型NDV的快速检测和精准定量,同时也为其核酸标准物质的研制奠定了基础.

关键词：新城疫病毒、基因Ⅶ.2亚型、反转录数字PCR、性能评估

所属期刊栏目：40

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划;中国动物卫生与流行病学中心创新基金项目

在线出版日期：2023-06-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：82-87