空肠弯曲杆菌SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)是一种人兽共患病病原菌,给养殖业带来了较大经济损失.为实现对空肠弯曲杆菌的快速检测,针对其MapA 基因序列设计特异性引物,优化反应条件和反应体系,建立了空肠弯曲杆菌SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法,并对该方法的特异性、敏感性、重复性进行了评估.结果显示:建立的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法具有良好的特异性,仅能特异性扩增出空肠弯曲杆菌,对胎儿空肠杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌无交叉反应;敏感性较强,最低检测限为6.42 copies/μL;以5个稀释度的重组质粒为模板分别进行组内和组间重复性试验,发现组内和组间Ct值变异系数(CV)均小于2.50％,说明该方法具有良好的可重复性.结果表明,本研究建立的SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR具有良好的特异性、敏感性及重复性,可用于空肠弯曲杆菌的快速诊断和流行病学调查.

关键词：空肠弯曲杆菌、SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR、特异性、敏感性、重复性

所属期刊栏目：40

分类号：S855.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：潍坊市科研创新平台-潍坊市宠物疾病防控工程技术研究中心项目

在线出版日期：2023-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：85-89