鉴别牛结节性皮肤病病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立及应用

摘要：

为实现牛结节性皮肤病病毒(LSDV)和羊痘病毒属(CaPV)其他成员的鉴别诊断,针对LSDV 010基因保守区域设计特异性引物及TaqMan探针,与文献报道的CaPV 068基因的通用引物及探针组合,通过优化反应体系和条件,建立了一种可同时鉴别检测LSDV和CaPV其他成员的双重荧光定量PCR检测方法.结果显示:本方法可以特异性扩增LSDV和CaPV其他成员,并且与其他牛、羊病毒无交叉反应,特异性好;对pLSDV-010和pCaPV-068质粒标准品的最低检测限均为15 copies/μL,具有较高的灵敏性;组内和组间变异系数均小于1.75％,重复性良好.应用本试验建立的方法与荧光定量PCR方法同时检测542份临床样品,发现CaPV的样品符合率为98.52％,LSDV为99.63％.本试验建立的方法为CaPV鉴别筛查、LSDV精准防控及流行病学调查提供了快捷有效的技术手段.

关键词：牛结节性皮肤病病毒、羊痘病毒属、双重荧光定量PCR、TaqMan探针、鉴别检测

所属期刊栏目：40

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;广西农业科技项目

在线出版日期：2023-02-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：117-124