牛传染性鼻气管炎病毒和牛病毒性腹泻病毒双重PCR检测方法的建立与应用

摘要：

为建立一种针对牛传染性鼻气管炎病毒(infectious bovine rhinortracheitis virus,IBRV)和牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)的双重PCR检测方法,根据GenBank中IBRV gB(UL27)和BVDV 5'-UTR基因序列分别合成特异性引物,优化反应条件,建立了能够同时检测IBRV和BVDV的双重PCR方法,并对其特异性、敏感性、重复性进行了测试.结果显示:该方法对IBRV、BVDV和IBRV/BVDV可分别扩增出500、198、500/198 bp的特异性目标条带,对牛呼吸道合胞体病毒、牛冠状病毒、牛细小病毒、牛纽布病毒和牛支原体检测结果均为阴性;对混合液中IBRV、BVDV的最低检测限分别为104和103 copies/μL;3次重复性试验结果一致.采用建立的方法对79份临床可疑牛血清样品进行IBRV、BVDV和IBRV+BVDV检测,阳性率分别为12.66％、17.72％和8.86％,与IBRV和BVDV单重PCR检测结果符合率分别为90.00％和93.33％,两种病原混合感染的阳性符合率为100％.结果表明,本研究建立的IBRV和BVDV双重PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性及重复性,为兽医临床快速诊断IBRV和BVDV提供了一种方便、快捷的分子生物学检测手段.

关键词：牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒性腹泻病毒、双重PCR、病原检测

所属期刊栏目：40

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：东西部科技合作项目;宁夏奶牛育种专项

在线出版日期：2023-02-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：115-120