三种非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒和两种核酸提取方法的比对

摘要：

为评价不同荧光PCR检测试剂盒对非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的检测效果,以及不同核酸提取方法对ASFV的提取差异,选取ASFV B646L基因标准物质作为模板参照,通过荧光PCR检测对标准曲线、最低检出限(LOD)、特异性、检测时间等进行比较,分析3个厂家商品化ASFV荧光PCR检测试剂盒(A、B、C)的综合性能;选取磁珠法和柱式法两种核酸提取方式,对标准物质核酸提取后进行ASFV荧光PCR扩增,以Ct值大小评价试剂的提取效果.结果显示:3种ASFV荧光PCR试剂盒决定系数(R2)分别为0.985、0.996、0.985,且特异性较好;3种ASFV荧光PCR试剂盒LOD介于10-1～10-2 copies/μL,A试剂盒反应循环数最多且反应时间最长(105 min),LOD为10-2 copies/μL.全自动核酸提取工作站与手工核酸提取Ct值无统计学差异(P>0.1),批内变异系数(CV)在1.5％以内.结果表明:3种荧光PCR检测试剂盒的综合性能较为理想,A试剂盒更适用于临床含毒量低的样品检测;两种核酸提取方法均可有效提取ASFV B646L基因质粒标准物质.本试验为科学、合理选择ASFV检测和提取试剂提供了数据参考.

关键词：非洲猪瘟病毒、标准物质、荧光PCR、核酸提取试剂

所属期刊栏目：39

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：吉林省动物疫病监测流调和防治项目2130108

在线出版日期：2022-12-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：112-117