重组羊痘病毒P32蛋白的真核表达与间接ELISA检测方法的建立

摘要：

为探索敏感性高、特异性强、高通量、操作简便的羊痘病毒(CaPV)检测方法,将编码CaPV P32抗原的核苷酸序列优化为适合在Sf9细胞中表达的偏好密码子,去除氨基酸序列跨膜区,优化蛋白表达条件,利用昆虫杆状病毒表达系统成功表达出了重组CaPV P32蛋白,建立了检测CaPV血清抗体的间接ELISA方法.建立的间接ELISA方法对相关的羊类病毒血清抗体无交叉反应,敏感性可达1:1024,组内和组间变异系数均低于10％.利用建立的间接ELISA方法,对480份临床血清样品进行抗体检测并与血清中和试验进行比对,发现两种方法的敏感性符合率为98.18％,特异性符合率为93.33％,总符合率为96.67％.本研究建立的CaPV P32血清抗体间接ELISA检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可进一步开发为商品试剂盒,用于现场高通量检测,具有较好的市场应用前景.

关键词：重组羊痘病毒P32蛋白、杆状病毒、真核表达、蛋白纯化、间接ELISA

所属期刊栏目：39

分类号：S851.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家肉羊产业技术体系项目;大连市高层次人才创新计划项目;农业农村部跨境动物疫病防控机制建设项目

在线出版日期：2022-07-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：111-118