无乳链球菌对奶牛乳腺成纤维细胞金属蛋白酶及uPA系统表达的影响

摘要：

为研究无乳链球菌(Streptococcus agalactiae,S.agalactiae)作用奶牛乳腺成纤维细胞(BMFBs)后对MMPs/TIMPs与uPA系统(uPA/PAI-1)表达的影响,以进一步阐明MMPs/TIMPs与uPA系统在调控细胞外基质(ECM)代谢的作用,将107 cfu/mL热灭活S.agalactiae菌液作用于BMFBs,在作用后不同时间点(6、12、24、48 h)通过RT-qPCR和Western Blot检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2、uPA、PAI-1 mRNA转录水平和相应蛋白表达水平,并用明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9的酶活性.结果显示:热灭活S.agalactiae作用后,MMP-9、TIMP-2、uPA、PAI-1 mRNA转录水平均有不同程度下降趋势,但MMP-2 mRNA水平上调,TIMP-1 mRNA水平呈先上升后下降趋势;明胶酶谱法检测MMP-2的酶活性较MMP-9明显,二者均在作用6 h、48 h活性最强;MMP-2和MMP-9蛋白表达水平与对照组相比主要呈先升高后下降趋势,但在作用后期MMP-2蛋白表达又出现了回升趋势;TIMP-1蛋白水平与对照组相比主要呈先下降后上升趋势,在作用前期与MMP-9蛋白表达相反,TIMP-2蛋白表达与对照组相比呈上升趋势;uPA和PAI-1蛋白水平与对照组相比均呈先降低后升高再降低趋势,均在24 h达到峰值,随后呈下降趋势.研究表明,热灭活S.agalactiae菌液可诱导BMFBs 中MMPs/TIMPs 表达,影响uPA 系统参与调控MMPs 的表达及活性.

关键词：无乳链球菌、成纤维细胞、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2、uPA、PAI-1

所属期刊栏目：38

分类号：S852.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目31460642

在线出版日期：2021-05-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共12页

页码：76-87