蓝舌病病毒血清Ⅰ型VP2与VP5、VP3与VP7两组蛋白在杆状病毒系统中的表达与鉴定

摘要：

为表达具有天然构象的蓝舌病病毒血清l型(BTV1)主要结构蛋白VP2、VP3、VP5和VP7,研制针对流行于我国的BTV1型毒株的病毒样颗粒(virus-like particles,VLP)疫苗提供基础,将编码BTV1VP2和VP5蛋白的基因分别克隆到双表达载体pFastBacDual的启动子pPH和pP10下游,构建重组质粒pFastBacDual-BTV1-VP2-VP5,将重组质粒转化DH 10Bac感受态细胞,获得重组穿梭质粒rBaemidBTV 1-VP2-VP5,转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒rBacBTV 1-VP2-VP5;按照同样策略,制备重组杆状病毒rBacBTV 1-VP3-VP7.使用兔抗BTV1-VP5蛋白多克隆抗体和鼠抗BTV-VP7蛋白单克隆抗体,分别对rBacBTV1-VP2-VP5和rBacBTV 1-VP3-VP7感染的Sf9细胞进行间接免疫荧光试验(IFA)检测,结果病毒感染细胞可见特异性荧光出现;使用兔抗BTV1-VP2蛋白多克隆抗体和兔抗BTV1-VP3蛋白多克隆抗体,分别对rBacBTV 1-VP2-VP5和rBacBTV 1-VP3-VP7感染的Sf9细胞进行Western-blot检测,可见相对分子质量约100 kDa左右的条带,大小与预期相符.IFA检测和Western Blot检测结果显示,BTV1 VP2、VP3、VP5和VP7蛋白均得以表达,且具有良好的反应原性.

关键词：蓝舌病病毒血清1型、主要结构蛋白、杆状病毒表达

所属期刊栏目：36

分类号：S852.65+9.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目31760744;国家公益性行业农业科研专项201303035;云南省中青年学术和技术带头人后备人才培养项目2017HB055

在线出版日期：2019-08-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：77-84