牛支原体和牛病毒性腹泻病毒二重二温式PCR检测方法的建立

摘要：

为建立一种牛支原体(Mycoplasma bovis,MB)和牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)的快速鉴别诊断方法,针对MB的uvrC基因和BVDV的5'端非编码区(5'-UTR)保守基因序列,分别设计两对特异引物,并将三温式PCR扩增程序简化为二个温度梯度,建立了鉴别MB和BVDV的二重二温式PCR方法.该方法能同时扩增MB和BVDV,扩增产物大小分别为412和170 bp.特异性试验结果显示,该方法对参试的所有毒株只扩增MB和BVDV基因组,对其它牛病原体无扩增;敏感性试验结果显示,该方法最低能同时检测到104拷贝的两种目的核酸;干扰性试验结果显示,该方法能同时检测两个模板不同浓度的组合,试验结果不受模板影响.综上,本研究所建立的二重二温式PCR方法特异、敏感、快速、简便,可应用于MB和BVDV临床鉴别诊断和流行病学调查.

关键词：二重二温式PCR、牛支原体、牛病毒性腹泻病毒、检测

所属期刊栏目：36

分类号：S854.43(动物医学（兽医学）)

资助基金：广西科技重大专项桂科 AA17204057;广西科技重点研发计划桂科 AB16380003

在线出版日期：2019-03-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：70-75