猪流行性腹泻病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立

摘要：

为建立一种适用于现场快速检测的猪流行性腹泻病毒(PEDV)LAMP技术,基于羟基萘酚蓝(HNB)的可视化显色特点,根据PEDV M基因编码区序列,设计合成1套引物,通过反应物浓度和反应条件优化,建立了可闭管检测的PEDV RT-LAMP检测方法.特异性和灵敏度试验结果显示,建立的RT-LAMP检测技术快速、灵敏、特异,可于1 h内检出0.2 mL 0.1 TCID50/mL的病毒RNA,与实时荧光RT-PCR检测方法灵敏度一致,与猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型以及猪链球菌2型核酸不发生交叉反应.利用该方法对187份送检的粪拭子及病死猪组织样品进行应用检测,检出阳性样品9份,与荧光定量RT-PCR方法检测结果一致.试验结果表明,所建立的方法快速、特异,重复性满足要求,适用于送检样品的PEDV快速检测.

关键词：猪流行性腹泻病毒、HNB显色、RT-LAMP

所属期刊栏目：36

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：北京市科技计划项目Z171100001317011;国家重点研发计划项目2016YFD0501104

在线出版日期：2019-03-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：58-64