鲑鱼甲病毒逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法研究

摘要：

鲑鱼甲病毒(Salmonid alphavirus,SAV)是鲑鱼胰脏病(Salmon pancreas disease,PD)病原,主要感染鲑科鱼类,目前在我国尚未分离到.为提高出入境鱼类中的SAV检测效率,根据SAV nsP1基因片段,设计3对特异性引物,建立了检测SAV的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法.该方法使用25μL反应体系,经优化后的反应温度为65℃,反应时间为1 h,检测限可达10个拷贝数的病毒核酸,且不与传染性鲑鱼贫血病毒、病毒性出血性败血症病毒、传染性造血器官坏死病毒、病毒性神经坏死病病毒、草鱼呼肠孤病毒和鲤春病毒血症病毒的RNA产生交叉反应.在反应体系中加入染料后,反应结果肉眼直接可见.本研究建立的RT-LAMP方法是一种特异性强、方便快捷的SAV检测方法,适合SAV的现场初筛和核酸检测.

关键词：鲑鱼甲病毒、逆转录环介导等温扩增检测方法、检测限、特异性

所属期刊栏目：35

分类号：S941.41+9(水产保护学)

资助基金：国家质量监督检验检疫总局科技计划项目2016IK013

在线出版日期：2018-10-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：99-103