病毒性出血性败血症病毒N基因的病毒样颗粒制备及定值

摘要：

为制备含有病毒性出血性败血症病毒(VHSV)N基因的RNA病毒样颗粒标准样品,通过RT-RCR扩增VHSV的N基因,将其克隆至含有组氨酸标签的pNH-MS2his载体中,构建重组原核表达载体pNH-MS2his-N;将重组质粒pNH-MS2his-N转化至表达菌株BL21(DE3),用1 mmol/L IPTG诱导表达、纯化;对病毒样颗粒进行鉴定及稳定性试验,使用数字PCR对病毒样颗粒进行定值.结果显示,该病毒样颗粒含VHSV N基因序列,并且稳定性良好,定值结果为8×106 copies/mL.结果表明,构建的病毒样颗粒可以作为RNA病毒检测时的标准品和质控品使用.

关键词：病毒性出血性败血症病毒、病毒样颗粒、N基因、数字PCR

所属期刊栏目：35

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金："十二五"国家科技支撑项目2013BAD12B02-03

在线出版日期：2018-01-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：100-103