鱼类病毒性出血性败血症病毒诊断胶体金免疫层析方法的建立

摘要：

为建立一种快速检测鱼类病毒性出血性败血症病毒(Viral haemorrhagic septicaemia virus,VHSV)的胶体金免疫层析方法(GICA),采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,以标记纯化的VHSVG蛋白单克隆抗体(Mab)10A7为捕捉抗体,将纯化的抗VHSVN蛋白的Mab 10EN单克隆抗体和羊抗鼠IgG抗体包被在硝酸纤维素膜上,作为检测带与质控带,经试验条件优化,组装形成胶体金免疫层析试纸条.用本试验研制的胶体金试纸条检测VHSV感染的CHSE细胞培养物.结果显示:在检测线和质控线均呈现红色条带,而健康的CHSE细胞培养物对照仅在质控线呈现红色条带;试纸条检出病毒培养物的病毒量最低限为104.0TCID50;随机挑取3个不同批次的试纸条,对阳性样品和阴性样品进行重复试验,未发现差异.特异性试验表明,该试纸条与传染性造血器官坏死病毒(IHNV)、传染性胰坏死病毒(IPNV)、鲤春病毒血症病毒(SVCV)、牙鲆弹状病毒(HRV)、草鱼呼肠孤病毒(GCRV)无交叉反应.将同一批次的试纸条在4℃条件下保存不同时间后进行检测,发现保存6个月的试纸条仍具有良好的稳定性.本试验研发的胶体金诊断试纸条具有良好的特异性、灵敏性和重复性,在快速辅助检测方面具有推广应用价值.

关键词：鱼病毒性出血性败血症病毒、胶体金、免疫层析法

所属期刊栏目：34

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金："十二五"国家科技支撑计划2013BAD12B02-03

在线出版日期：2017-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：92-97