金鱼造血器官坏死病毒 实时荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

金鱼造血器官坏死病毒(Goldfish haematopoietic necrosis virus,GFHNV)是一种可感染金鱼等鲤科鱼类,并可导致其死亡的疱疹病毒.为了快速检测病原,本研究根据GFHNV的主要衣壳蛋白(Major captor protein,MCP)序列中的一段保守基因序列,设计引物和TaqMan探针,建立了GFHNV特异性的实时荧光定量PCR检测方法;并利用PCR反应扩增出的MCP基因,制备了pUC-GFHNV重组质粒作为阳性对照.经试验,该方法检测限最低可达10个拷贝数的目的基因,而且与锦鲤疱疹病毒(Koi herpesvirus,KHV)、甲鱼虹彩病毒(Softshell turtle iridovirus,STIV)、流行性造血器官坏死病毒(Epizootic haematopoietic necrosis,EHNV)、斑点叉尾鮰病毒(Channel catfish virus,CCV)以及白斑综合症病毒(White spot syndrome virus,WSSV)等5种水生动物病毒无交叉反应.该方法具有简便、快速、敏感、特异等优点,为该病的诊断与病原检测提供了一个重要手段.

关键词：鱼类病毒病、金鱼造血器官坏死病毒、主要衣壳蛋白、实时荧光定量PCR、TaqMan探针

所属期刊栏目：34

分类号：S941.41+9(水产保护学)

资助基金：国家科技支撑计划2013BAD12B02;北京市观赏鱼产业创新团队BAIC03-2017

在线出版日期：2017-12-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：99-103