盐酸克伦特罗单克隆抗体的制备和鉴定

摘要：

为进一步建立克伦特罗(CL)残留检测方法,给制备CL残留检测试剂盒打下基础,进行了CL单克隆抗体(McAb)的制备研究.以重氮反应,将CL与牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵清白蛋白(OVA)偶联,分别制备免疫原和检测原,并通过杂交瘤技术,获得了5株能稳定分泌特异结合CL小分子的单克隆抗体杂交瘤细胞株(1E9A9、2A9C1、3F2E9、6G2E9、6E10D9).这5株细胞株经过体外传代培养和冻存复苏后均能稳定分泌抗体.用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)测定的这5株细胞上清液抗体效价分别为1:1.28×105、1:5.12×105、1:1.28×105、1:5.12×105、1:2.56×105;选用3F2E9、6E10D9细胞株,制备CL单克隆抗体腹水并纯化,其纯化后的腹水抗体效价分别为1:1.28×105、1:2.56×105,BCA(2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠)方法检测的浓度分别为1.60 mg/mL、1.54 mg/mL;最终通过斑点ELISA(Dot-ELISA)方法测定CL抗原与这2株抗体有较强的结合力.在上述方法的制备及验证下,成功获得了特异性较高的CL单克隆抗体,为进一步研制CL残留检测试剂盒奠定了基础.

关键词：盐酸克伦特罗、单克隆抗体、残留检测

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分类号：S851.34(动物医学（兽医学）)

资助基金："十三五"国家重点研发计划2016YFD0500708;山东省现代农业产业技术体系疫病控制岗位SDAIT-08-07;山东省农业重大应用技术创新课题;山东省科技发展计划2014GNC111011;山东省农业科学院青年英才培养工程;山东省农业科学院青年科研基金项目2016YQN53

在线出版日期：2017-03-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：91-95,105