猪流行性腹泻病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

摘要：

根据GenBank报道的N基因高度保守核苷酸序列，设计并合成一对引物。上下游引物与GenBank中登录的153株猪流行性腹泻病毒（PEDV）N基因全长序列匹配度分别是100%和97%。以本实验室分离流行毒株为模板，利用SYBR Green I荧光染料法进行RT-PCR扩增，获得扩增产物构建重组质粒作为阳性对照，建立检测猪流行性腹泻病毒核酸的方法。同一样品进行3次重复试验，变异系数＜0.9%。通过对临床样品进行检测和测序验证，核酸检测结果中的阳性样品准确率为100%。本研究所建立的荧光定量PCR检测方法具有快速、灵敏、准确等优点，可用于临床PEDV的检测及分子流行病学调查。

关键词：猪流行性腹泻病毒、N基因、实时荧光定量RT-PCR、检测

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：浙江省科技厅项目2014C32061，2014C02003；金华市农业类重点研究项目2014-2-003

在线出版日期：2016-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：62-66