鸡传染性法氏囊病血清抗体间接ELISA检测方法的建立

摘要：

为建立可检测鸡传染性法氏囊病血清抗体的间接ELISA检测方法,本研究经RT-PCR扩增IBDV VP2 (1nt-708nt)基因片段,并应用pET28a载体进行原核表达,亲和层析纯化重组蛋白作为包被抗原,建立检测IBDV血清抗体的间接ELISA方法.应用所建方法和IDEXX试剂盒,对采自不同地区的156份鸡血清样品进行平行检测和比较.结果表明,RT-PCR扩增获得708bp的VP2基因片段;含重组表达质粒pET28a-VP2的大肠杆菌BL21经IPTG诱导后,表达了约27kDa的VP2重组蛋白,表达量约占菌体蛋白的30.1%;建立的间接ELISA检测方法与IDEXX试剂盒比较,其特异性、敏感性和符合率分别达到90.24%、95.65%和94.23%.由此可见,本研究所建立的间接ELISA方法敏感、特异,适用于IBDV血清抗体的检测.

关键词：传染性法氏囊病、VP2、原核表达、间接ELISA

所属期刊栏目：32

分类号：S852.65+7(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2015-10-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：72-76