施马伦贝格病毒RT-LAMP检测方法的建立

摘要：

通过对施马伦贝格病毒（Schmallenberg virus，SBV）及其同属各病毒基因序列进行比对分析，设计了针对SBV S基因节段的一组6条特异性引物，经优化建立了SBV RT-LAMP检测方法，可在63℃恒温条件下，于50min内完成目的序列扩增，通过染料法和琼脂糖凝胶电泳法观察结果，其灵敏度可达10TCID50，与荧光RT-PCR方法具有相同的敏感性。特异性试验显示，本方法与同属的沙门达病毒（Shamonda virus）会发生交叉反应，需借助沙门达病毒S基因节段上的一个特异性酶切位点AflII进行酶切，实现两者的鉴别诊断。对103份临床样品的检测结果显示，本方法与荧光RT-PCR方法符合率为100%。本研究建立的RT-LAMP方法快速、简单、灵敏度高，不仅适用于实验室鉴定，还可应用于口岸、野外等的临床大规模监测。

关键词：施马伦贝格病毒、检测方法、RT-LAMP、荧光定量RT-PCR、样品检测

分类号：S852.65(动物医学（兽医学）)

资助基金：质检公益性行业专项201210018；国家科技支撑计划课题2013BAD12B00

在线出版日期：2015-04-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：73-77,82