10.3969/j.issn.1005-944X.2009.11.030
实时荧光定量PCR检测鸡传染性贫血病毒方法的建立
建立了Taqman实时荧光定量PCR方法检测鸡传染性贫血病毒(CAV).选取CAV病毒的序列设计引物和探针.以梯度稀释的含有CAV目的扩增片段的质粒作为标准品,进行定量PCR反应以确定检测灵敏度.2.0×105~2.0×102个拷贝,4个数量级的范围内定量PCR有"S"型扩增曲线,检测灵敏度为200个拷贝.根据病毒拷贝数与定量反应Ct值的关系,绘制了标准曲线.该方法具有特异性,对传染性支气管炎病毒、传染性法氏囊病毒、禽白血病病毒和马立克病毒核酸都没有扩增反应.采用实时荧光定量PCR方法检测试验感染鸡的肝脏、脾脏、肾脏、胸腺、法氏囊、泄殖腔棉拭子等样品,所有检测样品都有"S"型扩增曲线,且荧光信号值高.实时定量PCR检测CAV的方法,灵敏度高,特异性好,可以进行定量分析,在禽病的快速检测上具有重要意义.
鸡传染性贫血、实时荧光定量PCR、Taqman探针
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S858.31:S852.659.2(动物医学(兽医学))
2010-01-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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