氨基脲单克隆抗体制备及其ELISA检测方法的建立

摘要：

以氨基脲(SEM)和对醛基苯甲酸(CP)为原料合成半抗原(CP-SEM),将半抗原和载体蛋白偶联后免疫Balb/C小鼠,应用杂交瘤技术建立稳定分泌抗氨基脲的杂交瘤细胞株.常规制备腹水,用辛酸-硫酸铵法纯化,并对纯化的mAb进行特异性鉴定.通过对不同抗体组合的分析和条件的优化,建立检测氨基脲的间接竞争ELISA方法.利用对醛基苯甲酸衍生草鱼肌肉提取的氨基脲,用建立的ELISA方法进行检测,并计算回收率和最低检测限.经细胞融合、筛选及克隆化,共获得7株稳定分泌抗氨基脲的杂交瘤细胞株,其中4株亲和力较高.建立了间接竞争ELISA检测方法,该方法灵敏度达到0.1ng/mL,平均回收率为98.47%,在草鱼组织中的最低检测限为0.76 ng/g,回收率为70.55-100.56%,可用于肌肉中氨基脲残留的检测.

关键词：氨基脲、人工抗原、单克隆抗体、间接ELISA

所属期刊栏目：26

分类号：TS207.53(食品工业)

资助基金："十一五"攻关项目2006BAD03B04-06

在线出版日期：2009-11-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：40-43