猪细小病毒结构蛋白VP2主要抗原表位区基因的克隆及原核表达

摘要：

本丈参照GenBank发表的猪细小病毒结构蛋白VP2基因序列,设计一对引物,通过PCR方法扩增出一段包含VP2主要抗原表位编码区的片段,产物克隆到pGEM-T载体上,酶切后插入原核表达载体pET-32(a)的T7启动子下游,构建的重组质粒pET-VP2经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达.SDS-PAGE结果显示,表达产物分子量为39.1KDa,主要以包涵体形式存在.BandScan分析,表达量约占菌体蛋白的65.2%.表达产物用His亲和层析柱纯化.Western blotting结果显示,该种蛋白能与阳性血清发生特异性反应.结果说明,该重组蛋白具有抗原性,可以作为鉴别诊断用抗原.

关键词：猪细小病毒、结构蛋白VP2、主要抗原表位、原核表达

所属期刊栏目：26

分类号：S852.659.2(动物医学（兽医学）)

资助基金："十一五"国家科技支撑项目2006BAD06A12

在线出版日期：2009-04-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：42-44