实时荧光定量PCR法检测对虾皮下和造血器官坏死病毒

摘要：

应用实时荧光定量PCR最常用的TaqMan探针技术设计了探针和引物,并且用质粒技术构建了含有传染性皮下及造血器官坏死病毒(IHHNV)基因片段的阳性质控品,建立了检测IHHNVV的实时荧光定量PCR方法.对影响PCR的主要因素进行了优化,Mg2+浓度、引物和探针浓度、退火温度等均对扩增效率有明显影响.当Mg2+浓度为3.0-4.5mmol,退火温度为59～60℃时可获得最佳扩增效果.灵敏性试验表明该反应可检测体系中10拷贝的病毒核酸;该体系检测IHHNV具有很高特异性;对临床样品检测结果表明,该方法能快速、准确地检测样品中的IHHNV.

关键词：传染性皮下及造血器官坏死病毒、TaqMan探针、实时荧光定量PCR

所属期刊栏目：26

分类号：S941.41(水产保护学)

资助基金：国家质量监督检验检疫总局项目2004IK028

在线出版日期：2009-04-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：38-41