SIVp27抗原双抗体夹心ELISA检测方法的研究

摘要：

目的建立检测SIV p27抗原的双抗体夹心ELISA方法并进行初步应用.方法使用Protein A亲和层析柱纯化腹水中的SIV p27单抗,用过碘酸钠法对单抗进行辣根过氧化物酶标记.经抗体配对实验确定包被抗体和检测抗体,再用棋盘滴定法确定抗体工作浓度后,探索构建检测SIV p27抗原的双抗体夹心ELISA法.应用建立的双抗体夹心ELISA法,对SIV模型猴血浆标本和SHIV模型猴病毒分离培养上清标本进行了检测,并将其结果与Coulter公司试剂盒检测结果进行比较.结果以稀释至20 ug/mL的2E12为包被抗体、1∶400稀释的酶标3G3为检测抗体为ELISA最优体系.模型猴血浆标本和病毒分离培养上清标本的检测结果表明自建体系可以用于SIV p27抗原的检测,特异性良好,灵敏度略低于Coulter公司试剂盒.结论检测SIVp27抗原的双抗体夹心ELISA方法初步建成,为研制有独立知识产权的检测试剂奠定了一定的基础.

关键词：SIV p27抗原、单克隆抗体、双抗体夹心ELISA

所属期刊栏目：24

分类号：S8(畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂)

在线出版日期：2007-05-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：32-35