口蹄疫病毒VP1基因的克隆及结构蛋白VP1的原核表达

摘要：

根据Genbank中的O型口蹄疫病毒全基因序列设计了一对扩增口蹄疫病毒VP1基因的引物,用该特异性表达引物从口蹄疫阳性质粒pMD-P1中扩增得到目的基因VP1(639bp),用相同的限制性内切酶酶切目的基因和表达载体PET32a后构建重组表达载体,转化宿主菌BL21(DE3),经酶切及PCR鉴定筛选出阳性克隆,测序证明目的基因正确插入了表达载体,用不同浓度的IPTG诱导VP1基因的表达,收集菌液进行SDSPAGE电泳,Western-blotting分析蛋白免疫原性.结果表明,VP1结构蛋白在大肠杆菌中表达量较高,表达产物的分子量约为41Ku,并能被口蹄疫阳性血清所识别,经分析表达蛋白约占菌体蛋白的34%.口蹄疫病毒VP1蛋白在大肠杆菌中高效表达且表达产物具有免疫原性.

关键词：口蹄疫病毒、VP1基因、结构蛋白VP1、克隆表达

所属期刊栏目：24

分类号：S8(畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂)

在线出版日期：2007-04-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：23-25