CRISPR/Cas9技术编辑淀粉合成基因PUL

摘要：

利用CRISPR/Cas9技术对调控稻米脱支酶基因PUL定点编辑,获得了具有重要育种价值的PUL等位变异.首先设计2个guide RNA(gRNA)靶位点,构建OsPUL,基因定点编辑载体pC1300-Cas9.然后利用农杆菌介导侵染水稻材料中花11,提取T0代转基因植株的基因组DNA,并对编辑位点附近的DNA片段进行PCR检测及测序分析.结果表明,T0代材料中PUL的突变频率高达90％,其中纯合缺失突变率约占51％.对T1代纯合缺失突变体的千粒重性状的调查分析结果表明,部分pul的缺失突变能显著提高千粒重(大于5％).通过RT-PCR分析T0代突变体中相关基因表达表明,目的基因PUL、支链淀粉相关基因和粒重负调控相关基因(GS3和GW8)表达降低,而粒重正调控相关基因(GL7)表达增加.不同类型pul突变体的成功创建丰富了PUL的变异类型,为水稻遗传改良提供了重要的遗传材料.

关键词：水稻、基因编辑、CRISPR/Cas9、PUL、千粒重

所属期刊栏目：25

分类号：S511(禾谷类作物)

资助基金：转基因生物新品种培育重大专项2016ZX08001006

在线出版日期：2019-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：99-104,107