氟诱导大鼠脊髓神经细胞凋亡及氧化应激的研究

摘要：

目的:探讨氟对大鼠脊髓神经细胞凋亡及氧化应激水平的影响。方法:取54只6周龄Sprague-Dawley雌性大鼠，体重为150 ~ 200 g，适应性喂养1周后，采用随机数字表法分为对照组[给予含0 mg/L氟化钠（NaF）去离子水]、低氟组（给予含50 mg/L NaF去离子水）、高氟组（给予含100 mg/L NaF去离子水），每组18只，各组均食用标准饲料。染氟4、8、12周，每组选择6只大鼠观察氟斑牙发生情况，并采用Basso-Beattie-Bresnahan（BBB）评分对大鼠后肢运动功能进行评估；随后腹腔注射5%水合氯醛进行麻醉，经心脏穿刺处死大鼠，采集脊髓组织，检测氧化应激因子超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）含量。染氟12周，利用尼氏（Nissl）染色观察大鼠脊髓神经元形态学变化，原位缺口末端标记法（TUNEL）细胞凋亡检测试剂盒检测脊髓神经细胞凋亡情况，蛋白质印迹法检测大鼠脊髓组织B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）基因相关X蛋白（Bax）、Bcl-2基因相关启动子（Bad）、Bcl-2蛋白表达情况，免疫荧光染色观察脊髓神经元中Bax、Bcl-2蛋白表达情况。结果:染氟12周，低、高氟组大鼠均发生不同程度氟斑牙；对照、低氟、高氟组大鼠BBB评分比较，差异有统计学意义（
F = 14.09，
P < 0.001）。染氟12周，对照、低氟、高氟组SOD[（124.04 ± 4.87）、（96.66 ± 15.01）、（91.12 ± 15.87）U/mg prot]、GSH-Px活性[（561.92 ± 59.65）、（456.83 ± 29.51）、（385.07 ± 74.87）U/mg prot]及MDA[（9.96 ± 1.50）、（16.64 ± 2.05）、（20.80 ± 3.37）nmol/mg prot]、CAT含量[（8.97 ± 1.05）、（6.39 ± 0.97）、（6.42 ± 0.83）nmol/mg prot]比较，差异均有统计学意义（
F = 11.17、14.19、30.12、14.52，均
P < 0.05）；其中，低、高氟组SOD、GSH-Px活性及CAT含量均低于对照组，MDA含量均高于对照组（均
P < 0.05）；且高氟组GSH-Px活性低于低氟组，MDA含量高于低氟组（均
P < 0.05）。对照组大鼠脊髓神经元结构完整、细胞核清晰可见，Nissl小体染色均匀、数量较多，未见凋亡细胞；低、高氟组大鼠脊髓神经元Nissl小体染色不均匀、数量较少，凋亡细胞较多。对照、低氟、高氟组大鼠脊髓神经细胞凋亡率，脊髓组织Bax、Bad、Bcl-2蛋白表达水平比较，差异均有统计学意义（
F = 272.81、35.53、17.57、92.50，均
P < 0.05）。免疫荧光染色显示，对照、低氟、高氟组大鼠脊髓神经元中Bax、Bcl-2蛋白荧光强度比较，差异均有统计学意义（
F = 12.67、22.14，均
P < 0.05）。
结论:慢性氟中毒可诱导大鼠脊髓神经抗氧化酶活性降低、脂质过氧化水平升高，神经细胞凋亡增加。

关键词：氟、氧化应激、细胞凋亡、脊髓

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资助基金：山西省医学重点科研项目2021XM56;Key Medical Research Project of Shanxi Province2021XM56

在线出版日期：2024-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：21-28