布鲁氏菌外膜蛋白L16、L19对THP-1细胞免疫调控因子表达的影响

摘要：

目的:初步探究布鲁氏菌外膜蛋白16、19脂化型重组蛋白（L16、L19）对人单核细胞白血病细胞系（THP-1细胞）免疫调控因子表达的影响。方法:以佛波酯（PMA）活化的THP-1细胞为体外实验细胞模型，采用成组设计，分别将L16、L19与THP-1细胞共培养（L16刺激组、L19刺激组），并以PMA活化的THP-1细胞为对照组。共培养4 h时，分别采用免疫荧光染色（IFS）法和蛋白免疫印迹（Western blot）法检测L16、L19是否进入细胞。共培养12、24 h时，实时荧光定量PCR法测定干扰素调节因子1（IRF-1）、Ⅱ类主要组织相容性复合物反式激活蛋白（CⅡTA）mRNA表达水平；Western blot法检测T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3（Tim-3）和γ干扰素受体1（IFNGR1）蛋白表达水平。结果:共培养4 h时，可见L16、L19分别进入L16、L19刺激组THP-1细胞内。共培养12 h时，L16刺激组IRF-1 mRNA表达水平（0.16 ± 0.15）明显低于对照组（1.00 ± 0.00，
P < 0.05）；共培养24 h时，L16刺激组CⅡTA mRNA表达水平（0.17 ± 0.10）明显低于对照组（1.00 ± 0.00，
P < 0.05）；共培养12、24 h时，L19刺激组IRF-1、CⅡTA mRNA表达水平与对照组比较差异均无统计学意义（均
P > 0.05）。Western blot结果显示，共培养12、24 h时，对照组、L16刺激组、L19刺激组INFGR1、Tim-3蛋白表达水平比较，差异均有统计学意义（
F = 50.92、6.80、148.73、156.57，均
P < 0.05）。其中，共培养12 h时，L16、L19刺激组INFGR1蛋白表达水平均明显低于对照组，且L19刺激组高于L16刺激组（均
P < 0.05）；而L19刺激组Tim-3蛋白表达水平高于对照组（
P < 0.05）。共培养24 h时，L16、L19刺激组INFGR1蛋白表达水平均低于对照组，且L19刺激组高于L16刺激组（均
P < 0.05）；而L16刺激组Tim-3蛋白表达水平高于对照组和L19刺激组（均
P<0.05）。
结论:布鲁氏菌L16可以下调THP-1细胞IRF-1、CⅡTA mRNA表达水平；L16、L19均能够下调IFNGR1、上调Tim-3蛋白表达水平。

关键词：布鲁杆菌属、外膜蛋白、免疫调控因子

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资助基金：广东省基础与应用基础研究基金2021A1515011885;南方医科大学珠江医院院长基金yzjj2020qn16;Guangdong Basic and Applied Basic Research Foundation2021A1515011885;President's Foundation of Zhujiang Hospital of Southern Medical Universityyzjj2020qn16

在线出版日期：2023-07-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：345-350