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10.3760/cma.j.cn231583-20200804-00214

LC3B、P62、Beclin1在慢性氟中毒大鼠肝脏中的表达及自噬在氟中毒肝损伤中的作用

引用
目的:观察慢性氟中毒大鼠肝脏微管相关蛋白1轻链3(LC3)B、P62、Beclin1的蛋白和mRNA表达,探讨自噬在氟中毒肝损伤发病机制中的作用。方法:采用成组设计,54只SD大鼠,按照体重(100 ~ 120 g)采用随机数字表法分为9组,每组6只,雌雄各半,分别为对照组(NC组)、低氟组(LF组)、高氟组(HF组)、NC +雷帕霉素(RAP)组、LF + RAP组、HF + RAP组、NC +氯喹(CQ)组、LF + CQ组、HF + CQ组。NC组饮用自来水(氟离子浓度< 0.5 mg/L),LF和HF组分别饮用氟离子浓度为5.0、50.0 mg/L含氟水;NC + RAP、LF + RAP、HF + RAP组分别以相应的饮水饲养3个月后经腹腔每天注射1.5 mg/kg RAP,共10 d;NC + CQ、LF + CQ、HF + CQ组分别以相应的饮水饲养3个月后经腹腔每天注射60 mg/kg CQ,共10 d。采集各组大鼠四肢骨、24 h尿液,检测骨氟、尿氟含量;苏木素-伊红染色法观察肝组织形态学变化;免疫组织化学法、实时荧光定量PCR法检测肝脏LC3B、P62、Beclin1蛋白和mRNA表达情况。结果:染氟后,与NC组比较[(0.03 ± 0.00)mg/kg、(0.34 ± 0.08)mg/L],HF组骨氟[(3.86 ± 0.08)mg/kg]、尿氟含量[(1.11 ± 0.16)mg/L]均较高( P均< 0.05)。光镜下,NC组大鼠肝组织小叶结构清晰,肝索排列整齐,细胞结构正常,LF、HF组出现不同程度的肝细胞水肿;给予RAP后,与相应染氟组比较,肝细胞形态未见明显变化;给予CQ后,与相应染氟组比较,可见肝细胞明显水肿,随染氟浓度增加水肿程度加重。与NC组比较,HF组LC3B、Beclin1蛋白表达量较高( P均< 0.05),P62蛋白表达量较低( P < 0.05)。腹腔注射RAP后,与LF组比较,LF + RAP组LC3B、P62蛋白表达量较低( P均< 0.05);与HF组比较,HF + RAP组LC3B、Beclin1蛋白表达量较低( P均< 0.05)。腹腔注射CQ后,与LF组比较,LF + CQ组P62蛋白表达量较高( P < 0.05);与HF组比较,HF + CQ组P62蛋白表达量较高( P < 0.05)。 结论:早期(3个月)氟摄入可促进大鼠肝细胞自噬,引起肝细胞水肿,RAP有类似作用;CQ可能通过抑制肝细胞自噬而诱导肝脏损伤。

氟中毒,牙、肝损伤、自噬、雷帕霉素、氯喹

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国家自然科学基金U1812403;贵州省科技合作计划项目黔科合LH字[2017]7192号;贵州省自然科学基金黔科合基础[2018]1135号;贵州医科大学2018年度学术新苗培养及创新探索专项黔科合平台人才[2018年]5779-37;贵州省研究生科研基金KYJJ2017010;National Natural Science Foundation of ChinaU1812403;Guizhou Province Science and Technology Cooperation Program Project[2017]7192;Guizhou Provincial Natural Science Foundation[2018]1135;Guizhou Medical University 2018 Academic New Seedling Cultivation and Innovative Exploration Special Project[2018]5779-37;Guizhou Provincial Graduate Research FundKYJJ2017010

2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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