氟砷联合对成骨与破骨细胞共培养体系中TRAF-6介导的NF-κB1信号通路相关蛋白表达的影响

摘要：

目的:探讨氟、砷及氟砷联合染毒对小鼠成骨细胞MC3T3-E1与小鼠单核巨噬细胞RAW264.7共培养体系中肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF-6）/核因子κB1（NF-κB1）信号通路中相关蛋白表达的影响。方法:MC3T3-E1细胞经成骨诱导剂诱导后与RAW264.7细胞建立共培养体系，体外培养7 d，采用析因设计，分别用不同剂量的氟化钠（0.0、0.1、0.4、1.6 mmol/L NaF，F）、亚砷酸钠（0.0、0.5、2.5、12.5 μmol/L NaAsO
2，As）以及不同剂量的氟砷联合培养基培养24 h。采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测核因子κB受体活化因子（RANK）、TRAF-6、NF-κB1、T细胞活化因子（NFATc1）、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）的蛋白表达水平。
结果:氟单独作用时，与对照组（F
0.0As
0.0，1.00 ± 0.00）比较，各剂量组RANK、NF-κB1、TRAP蛋白表达（1.11 ± 0.04、1.29 ± 0.05、1.38 ± 0.04，1.24 ± 0.04、1.13 ± 0.03、1.34 ± 0.05，1.12 ± 0.03、1.24 ± 0.04、1.61 ± 0.06）增加（
P均< 0.05）；TRAF-6蛋白表达在F
0.1和F
1.6组（1.23 ± 0.04、1.35 ± 0.03）增加（
P均< 0.05）。砷单独作用时，与对照组（F
0.0As
0.0）比较，RANK、TRAF-6、NF-κB1蛋白表达在As
0.5组增加（
P均< 0.05），RANK和NFATc1蛋白表达在As
12.5组减少（
P均< 0.05）。氟砷联合作用时，同一染氟剂量，RANK蛋白表达在F
0.1As
0.5组，TRAF-6蛋白表达在F
0.1As
12.5、F
0.4As
0.5、F
0.4As
2.5组，NF-κB1蛋白表达在F
0.1As
0.5、F
0.4As
2.5、F
0.4As
12.5组，NFATc1蛋白表达在F
0.1As
0.5、F
0.4As
0.5组，TRAP蛋白表达在F
0.1As
12.5组均高于相应的单独氟染毒组（F
0.1、F
0.4，
P均< 0.05），但低于氟、砷单独染毒之和。同一染砷剂量，RANK蛋白表达在F
0.1As
12.5组，TRAF-6蛋白表达在F
0.1As
12.5、F
0.4As
2.5组，NF-κB1蛋白表达在F
0.1As
12.5、F
0.4As
2.5、F
0.4As
12.5、F
1.6As
2.5组，TRAP蛋白表达在F
1.6As
2.5、F
1.6As
12.5组均高于相应的单独砷染毒组（As
2.5、As
12.5，
P均< 0.05），但低于氟、砷单独染毒之和。氟对RANK、TRAF-6、NF-κB1、NFATc1、TRAP蛋白表达均有主效应作用（
F=3.41、341.73、66.01、56.49、147.40，
P均< 0.05）；砷对各蛋白指标也均有主效应作用（
F=686.71、174.96、107.32、235.80、331.37，
P均< 0.05）；氟砷联合作用对各蛋白指标均有交互作用（
F=50.39、234.94、116.72、67.77、36.56，
P均< 0.05）。
结论:在MC3T3-E1与RAW264.7细胞的共培养体系中，氟可激活TRAF-6介导的NF-κB1信号通路相关蛋白表达，从而促进破骨细胞分化；砷对相关蛋白表达作用不完全一致。氟砷联合染毒对TRAF-6介导的NF-κB1信号通路相关蛋白表达的交互作用主要表现为拮抗作用。

关键词：氟、砷、联合作用、共培养、TRAF-6/NF-κB1信号通路

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资助基金：国家自然科学基金81472927;National Natural Science Foundation of China81472927

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：318-324