DON对体外培养软骨细胞炎性细胞因子、CD44、MMP-13及整合素表达的影响

摘要：

目的:观察脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）对体外培养软骨细胞炎性细胞因子、人类白细胞分化抗原（CD）44、基质金属蛋白酶（MMP）-13、整合素表达的影响。方法:提取1 ~ 2日龄Wistar乳鼠原代软骨细胞，采用甲苯胺蓝染色法进行软骨细胞鉴定，CCK-8法检测DON（剂量分别为0.0、0.1、0.2、0.4、0.8 μg/ml）染毒24、48、72 h软骨细胞增殖情况，根据细胞存活率选取0.00（对照）、0.05、0.10、0.15、0.20 μg/ml DON用于后续实验，确定作用时间为48 h。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测细胞培养上清液白细胞介素（IL）-6、IL-1β、肿瘤坏死因子（TNF）-α、CD44及MMP-13含量；蛋白免疫印迹（Western blot）法检测软骨细胞CD44和整合素α2、α5、β1蛋白表达水平。结果:随着DON剂量和作用时间增加，软骨细胞存活率逐渐降低，存在浓度和时间依赖性（
P均< 0.01）。细胞培养上清液IL-6含量组间比较差异有统计学意义（
H = 13.425，
P < 0.01），其中0.10 μg/ml组[中位数（四分位数间距）：256.89（191.02，477.58）pg/ml]显著高于对照组[10.37（0.00，119.13）pg/ml，
P < 0.05]；IL-1β和TNF-α含量组间比较差异无统计学意义（
F = 0.881、1.317，
P均> 0.05）；0.10、0.15、0.20 μg/ml组CD44含量[（0.87 ± 0.21）、（0.85 ± 0.24）、（0.77 ± 0.17）pg/ml]明显低于对照组[（1.06 ± 0.19）pg/ml，
P均< 0.05]；MMP-13含量组间比较差异有统计学意义（
F = 7.947，
P < 0.01）。CD44和整合素α2、α5、β1蛋白表达水平组间比较差异有统计学意义（
F = 5.737、6.562、6.074、4.476，
P < 0.05或< 0.01）。
结论:DON可能通过增加IL-6，MMP-13，整合素α2、β1表达和抑制CD44、整合素α5表达，破坏细胞与细胞外基质间的平衡，造成软骨损伤。

关键词：软骨细胞、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、炎性细胞因子、白细胞分化抗原44、基质金属蛋白酶-13、整合素

所属期刊栏目：39

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：178-183