慢性氟中毒大鼠脑组织Erk激酶、AMPA受体亚基GluR1和GluR2的表达及硫酸软骨素的保护作用

摘要：

目的 研究慢性氟中毒中枢神经系统损伤的机制,探讨硫酸软骨素的神经保护作用.方法 48只雌性SD大鼠,体重为90～120 g.按体重采用随机数字表法分为8组,每组6只,分别为对照组,自由饮用自来水;低、高剂量染氟组,自由饮用含氟量为10、50 mg/L的自来水;对照、低剂量染氟、高剂量染氟分别加生理盐水组,按要求饲养180 d后,用0.66 mg/kg生理盐水连续腹腔注射5d(每天1次);低、高剂量染氟分别加硫酸软骨素组,按要求饲养180 d后,用0.66 mg/kg硫酸软骨素连续腹腔注射5d(每天1次).上述各组均饲以标准营养动物饲料,饲养周期为185 d,饲养结束后处死大鼠取脑组织.采用HE染色观察各组大鼠脑组织病理改变;免疫组织化学法(免疫组化)检测脑皮质中磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶1/2(phospho-Erk1/2),谷氨酸受体1、2(GluR1、GluR2)表达水平;免疫印迹法(Western Blot)检测脑皮质中Erk 1/2、phospho-Erk1/2、GluR1、GluR2蛋白水平.结果 各染氟组大鼠大脑皮质均可见神经元嗜酸性变化、丢失和层次排列不整齐,各染氟+硫酸软骨素组形态学改变均较各染氟组有明显改善.免疫组化结果显示,与对照组[(0.44±0.09)％、(1.49±0.05)％、(2.51±0.54)％]比较,低、高剂量染氟组phospho-Erk 1/2[(1.47±0.09)％、(1.03±0.05)％]、GluR2[(2.37±0.06)％、(3.38±0.12)％]表达水平升高,GluR1[(1.49±0.02)％、(0.99±0.19)％]表达水平降低(P均＜ 0.05).Western Blot结果显示,与对照组(1.00±0.12、1.76±0.33)比较,低、高剂量染氟组Erk 1/2(3.10±0.76、1.99±0.01)、phospho-Erk1/2(3.27±0.25、2.67±0.05)蛋白水平升高(P均＜0.05);与低剂量染氟组比较,低剂量染氟+硫酸软骨素组Erk1/2、phospho-Erk1/2蛋白水平(1.30±0.31、2.20±0.34)明显降低(P均＜ 0.05).与对照组(1.86±0.47、1.17±0.27)比较,低、高剂量染氟组GluR1蛋白水平(1.09±0.26、0.61±0.14)明显下降,GluR2蛋白水平(1.99±0.42、3.38±0.27)显著升高(P均＜0.05);与低、高剂量染氟组比较,低剂量染氟+硫酸软骨素、高剂量染氟+硫酸软骨素组GluR2蛋白水平(1.53±0.41、2.65±0.32)显著降低(P均＜ 0.05).低、高剂量染氟组phospho-Erk1/2蛋白水平与GluR1蛋白水平呈负相关(r=-0.975、-0.991,P均＜ 0.05),与GluR2蛋白水平呈正相关(r=0.986、0.993,P均＜0.05).结论 慢性氟中毒引起的中枢神经系统损伤可能与GluR1、GluR2激活Erk1/2信号通路有关,硫酸软骨素对这种损伤有一定的保护作用.

关键词：大鼠、氟中毒、细胞外信号调节蛋白激酶1/2、受体、谷氨酸、硫酸软骨素

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资助基金：国家自然科学基金81260417;地方病与少数民族性疾病教育部重点实验室贵州医科大学开放课题基金资助项目黔教合KY字[2018]480号;贵州省科技厅贵阳医学院联合基金黔科合LG[2012]006号National Natural Science Foundation of China81260417;the Foundation for Key Laboratory of Endemic and Minority Diseases;Ministry of EducationKY [2018]480;Guizhou Province Science and Technology Agency-Guiyang Medical College Joint FundLG [2012]006

在线出版日期：2019-07-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：446-452