10.3760/cma.j.issn.2095-4255.2016.07.003
T-2毒素和硒对软骨不同分化层细胞增殖的影响
目的 检测T-2毒素和硒对软骨不同分化层细胞增殖的影响,为大骨节病软骨损伤研究提供依据.方法 用分化培养基(常规培养液含1% ITS)分别诱导鼠软骨前体细胞系ATDC5 0、7、14、21d,实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)检测胶原蛋白Ⅱ(ColⅡ)、胶原蛋白X(Col X)的mRNA水平,确定其处于软骨不同分化层;T-2毒素(含量分别为1、5、10、20、50、100 μg/L)和T-2毒素+硒(0.1 mg/L)分别作用于ITS诱导0、7、14、21d的ATDC5细胞24、48 h,噻唑蓝(MTT)法检测T-2毒素和硒对软骨不同分化层细胞增殖的影响.结果 ITS诱导ATDC5细胞14、21 d,软骨细胞ColⅡmRNA(10.73±4.55、3.16±0.19)均高于0 d(1.00±0.00,P均<0.05);ITS诱导ATDC5细胞21d,软骨细胞Col X mRNA(49.21±9.54)显著高于0 d(1.00±0.00,P< 0.05).低含量T-2毒素(1、5、10 μg/L)作用不同分化层细胞24 h出现代谢性补偿现象刺激细胞增殖,作用48 h无代谢补偿现象;中高含量T-2毒素(20、50、100 μg/L)作用不同分化层细胞24、48 h,T-2毒素对21 d细胞的抑制率[24 h:(13.92±2.47)%、(47.78±4.22)%、(67.24±2.48)%,48 h:(15.84±2.85)%、(55.31±0.50)%、(70.89±9.88)%]均低于0 d[24 h:(38.46±6.14)%、(53.20±6.20)%、(73.94±1.93)%,48 h:(74.83±1.80)%、(88.98±1.51)%、(92.68±0.42)%]、7 d[24 h:(24.15±1.27)%、(45.19±1.29)%、(71.79±0.94)%,48 h:(47.91±4.71)%、(77.84±0.52)%、(89.41±052)%]、14d [24 h:(25.87±5.41)%、(62.50±2.50)%、(75.34±1.81)%,48 h:(59.53±1.13)%、(80.32±4.54)%、(95.22±1.22)%,P均<0.05].T-2毒素+硒作用不同分化层细胞48 h,中高含量T-2毒素(20、50、100 μg/L)+硒时,T-2毒素对21 d细胞的抑制率[(13.60±0.50)%、(50.76±6.99)%、(82.54±2.52)%]均低于0 d[(72.65±5.80)%、(88.92±0.70)%、(90.32±2.20)%]、7 d[(38.69±1.96)%、(75.75±0.22)%、(86.90±1.91)%]、14 d[(77.90±2.20)%、(94.11±0.42)%、(94.10±0.46)%,P均<0.05].结论 ITS诱导21d,ATDC5细胞对T-2毒素的敏感性低于其他不同分化层细胞,加硒后对T-2毒素的敏感性仍低于其他不同分化层细胞;提示T-2毒素有可能通过骨髓等其他途径损伤深层软骨细胞,为大骨节病软骨层坏死的机制提供了新的线索.
T-2毒素、硒、大骨节病
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R394.2;R684.1;R780.2
2016-08-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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