10.3760/cma.j.issn.1000-4955.2012.02.006
氟通过胞外信号调控激酶通路对成骨细胞增殖作用的影响
目的 观察氟通过胞外信号调控激酶(ERK)通路对成骨细胞(MC3T3-E1)增殖作用的影响.方法 取小鼠成骨细胞(MC3T3-E1)进行体外培养,加入不同浓度的氟(Fˉ,0、200、400、600、1000、2000、4000、8000、10 000 μmol/L)培养24、48 h,甲基噻唑蓝(MTT)法筛选出促进细胞增殖的最适浓度.根据最适浓度,将成骨细胞单纯随机分为3组:对照组(Fˉ,0 μmol/L)、染氟组(Fˉ,400 μmol/L)、染氟抑制组(Fˉ,400 μmol/L+PD9805,10 μmmol/L).培养48 h后应用流式细胞术检测各组细胞周期;Western bolt法和免疫荧光法检测各组磷酸化ERK(P-ERK)蛋白表达.结果 400 μmol/L的氟是促进成骨细胞增殖的最适合浓度.与对照组比较[(76.12±10.08)%、(2.06±0.31)%],染氟组G0/G1期细胞数[(63.04±8.12)%]明显减少,S期细胞数[(9.13±2.08)%]明显增多(P均< 0.05);而染氟抑制组G0/G1期细胞数[(92.11±9.01)%]明显增多(P<0.05).Western blot结果表明,与对照组[(100.00±0.00)%]比较,染氟组成骨细胞P-ERK蛋白表达水平[(131.24±13.88)%]明显增高(P<0.05),染氟抑制组P-ERK蛋白表达[(91.33±9.68)%]未见明显改变(P>0.05);免疫荧光法检测结果与Western blot法相似.结论 400 μmol/L氟可以促进成骨细胞增殖,ERK通路在氟促进成骨细胞的增殖作用中起到了关键的作用.
成骨细胞、氟、细胞增殖、细胞外信号调节MAP激酶类
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R599(全身性疾病)
国家自然科学基金81170808;30771813
2012-07-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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