10.3760/cma.j.issn.1000-4955.2010.01.015
细粒棘球绦虫转Eg95-EgA31融合基因苜蓿疫苗免疫小鼠后脾细胞因子的动态观察
目的 动态观察细牲棘球绦虫(Eg)转Eg95-EgA31融合基因苜蓿疫苗免疫Balb/c小鼠后脾细胞因子的变化.方法 88只Balb/c小鼠按体质量随机分为两组,用转基因苜蓿叶蛋白提取液(20 s/L)100 μl口服灌胃和10μl鼻腔黏膜接种分别免疫小鼠,每3天1次,连续2个月.在末次免疫后0(对照)、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20周各组剖杀4只小鼠,取脾,分离脾细胞,体外经Eg粗抗原(EgAg)或刀豆蛋白A(ConA)刺激培养48 h,诱生白细胞介素(IL)-12、γ干扰素(IFN-γ)和IL-10;经EgAg或脂多糖(LPS)刺激培养72 h,诱生肿瘤坏死因子α(TNF-α).收集脾细胞培养上清液,常规ELISA法检测IL-12、IFN-γ、TNF-α和IL-10水平.结果 口服灌胃组的IL-12、IFN-γ、TNF-α和IL-10水平分别在免疫后4~6、2~8、2~6、4~12周升高,分别在免疫后4、2、2、8周达最高水平,其值分别为(25.0±5.8)、(575.0±28.9)、(50.0±11.5)、(42.5±2.9)ng/L,与0周[(11.3±2.5)、(125.0±28.9)、(11.3±2.5)、(12.5±2.9)ng/L]比较,差异有统计学意义(P均<0.01);鼻腔黏膜接种组的IL-12、IFN-γ、TNF-α和IL-10水平分别在免疫后4~6、2~10、4~10、6~16周升高,分别在免疫后6、4、6、6周达最高水平,其值分别为(25.0±5.8)、(725.0±28.9)、(27.5±2.9)、(60.0±11.5)ng/L,与0周[(11.3±2.5)、(125.0±28.9)、(11.3±2.5)、(12.5±2.9)ng/L]比较,差异有统计学意义(P均<0.01).EgAg、ConA、LPS刺激组的细胞因子水平高于相应的脾细胞悬液组(P<0.05或<0.01),ConA或LPS刺激组的细胞因子水平高于相应的EgAg刺激组(P<0.05或<0.01).结论 细粒棘球绦虫转Eg95-EgA31融合基因苜蓿疫苗在免疫早期(2~10周)可诱导小鼠产生Th1和Th2混合型免疫应答.
细粒棘球绦虫、植物、基因修饰、紫苜蓿、细胞因子类
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R3(基础医学)
国家自然科学基金30671835
2010-04-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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