10.3760/cma.j.issn.1000-4955.2009.03.013
细粒棘球绦虫转Eg95基因苜蓿疫苗的培育及鉴定
目的 培育并鉴定细粒棘球绦虫转Eg95基因苜蓿疫苗.方法 利用转pBI-Eg95质粒的根癌农杆菌LBA4404株介导的苜蓿子叶浸染法,将Eg95基因导人紫花苜蓿基因组,转Eg95基因苜蓿外植体在含有卡那霉素的选择培养基上经愈伤、出芽和生根阶段生长出小苗,最后移栽到装有营养土的花盆中,生长2~3个月,获得完整的转Eg95基因苜蓿疫苗.提取转Eg95基因苜蓿的DNA、RNA及叶蛋白,采用PCR、RT-PCR、十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western blot法进行鉴定.结果 PCR、RT-PCR法在471 bp处均扩增出目的条带;SDS-PAGE及Western blot法可见转Eg95基因苜蓿蛋白在相对分子质量约16.5×103处出现特异条带,与预期结果相符;Bio-Rad Quantity one系统分析表达效率约占提取总苜蓿叶蛋白的0.06%.结论 成功培育出细粒棘球绦虫转Eg95基因苜蓿疫苗.
细粒棘球绦虫、植物、基因修饰、紫苜蓿、疫苗
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R59(全身性疾病)
国家自然科学基金30671835
2009-06-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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